ADN recombinante en la naturaleza y ADN recombinante artificial en Cáncer Gástrico

DNA Recombinante en la naturaleza (plásmidos)

El DNA se recombina de forma natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral.  En el caso de las bacterias, como el Helicobacter pylori la transformación le permite capturar DNA libre que puede ser parte del cromosoma de otra bacteria, incluso de otra especie bacteriana; también puede haber transformación cuando capturan diminutas moléculas de DNA llamadas plásmidos, los cuales le permiten a las bacterias crecer en ambientes nuevos; un claro ejemplo de esto lo encontramos en las bacterias que tienen plásmidos resistentes a antibióticos. 

DNA Recombinante Artificial

La tecnología del ADN recombinante, se basa en incorporar el gen humano de una proteína conocida, a través de una molécula de ADN artificial formada in vitro, a una célula hospedera. Se usa básicamente para la obtención de anticuerpos monoclonales. Las citoquinas más usadas como tratamiento directo del cáncer son:

-El Interferón alfa: son producidas por distintas células e incluyen un rango amplio de actividades biológicas, como son: la inducción de resistencia celular a virus, regulación de la función inmune, regulación del crecimiento y diferenciación de muchos tipos celulares.

-La Interleuquina 2: induce la actividad biológica a través de un receptor específico de membrana, el cual se encuentra frecuentemente expresado en las células inmunes, ya que juega un rol central en la respuesta inmune, como consecuencia de la activación antigénica.

Bibliografia:

• Josefa R, Lina M, Nataly C. Terapia génica para el tratamiento del cáncer. Rev. colomb. cancerol. [Internet]. 2014. [Citado, 23 de noviembre 2018]; 18(1). Disponible:http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0123-90152014000100005&script=sci_arttext&tlng=es

Western Blot para Cáncer Gástrico

El ensayo MP Diagnostics(MPD) HELICO BLOT 2.1 Western blot Kit Assay es un ensayo enzimático cualitativo para la detección de anticuerpos frente a Helicobacter pylori (H. pylori) en suero o plasma humanos, con la indicación adicional de estado de infección actual. Esta es una versión mejorada de HELICO BLOT 2.0 donde además del lisado bacterial, hay un antígeno recombinante de lato valor predictivo para la indicación de infección actual por H. pylori. El producto esta destinado para uno como prueba serológica para la detección tanto de infección actual como infección pasada con H. pylori.

Bibliografía: 

• Jing L , Barry R , Sufang H; et al. [Internet]. 2013 [citado, 16 de noviembre 2018]; 141(12). Disponible en: https://translational-medicine.biomedcentral.com/track/pdf/10.1186/1479-5876-11-241
• Valdés S, Latteri L, Polus. Tumorigenesis Gastrica.[internet]. 2014.[citado, 16 de noviembre de 2018];51(1). Disponible en: http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1851-30342014000100006
• Eugenia M, Karl S, Henry D; et al. Inmunoglobulina anti helicobacter pylori por Elisa y Western Blot.[internet]. [citado, 16 de noviembre de 2018]. Disponible en: http://actamedica.medicos.cr/index.php/Acta_Medica/article/view/538/499

Prueba de PCR para el Cáncer Gástrico

Tema: Evaluación de diferentes pruebas para el diagnóstico de Helicobacter pylori.

Objetivo: Determinar índice de desempeño, sensibilidad, especificidad y valores de cuatro métodos invasivos del Helycobacter pylori.

Tipo de Muestra Biológica: Biopsia de mucosa gástrica.

Tipo de Ácido Nucleico a ser extraído: ADN genómico bacteriano. 

Método Físico: Congelación a -20oC 

Método Químico: Amortiguador Tris-HCl 50 mM,pH7.2; EDTA 1mM con SDS al 1% y 100 µg de proteinasa K/ml.

Gen o secuencia a amplificar: gen ureC.

PCR: Stándar, 35 ciclos.

Visualización: EFO

Bibliografía: 

• Emiko R, Masanori S, David Y. PCR Detection of Helicobacter pylori in Clinical Samples. Methods Mol Biol.  [Internet], 2013.  [Citado 10 noviembre 2018]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3973746/pdf/nihms564458.pdf

Una Prueba de Tamizaje y Una Confirmatoria para el Cáncer Gástrico

 Prueba de Tamizaje

-Test de pepsinógeno sérico

Esta es una prueba serológica no invasiva que consiste en la medición de los dos tipos de pepsinógenosérico (PGi y PGii). 

-Gastrina-17

Para identificar inicialmente pacientes con gastritis atrófica. Sin embargo, en pacientes con presencia de cáncer gástrico, existe un marcado aumento de las cantidades de gastrina-17, pero no diferencia si el cáncer se encuentra en una fase temprana o avanzada.

-Estudios con bario

Inicialmente esta prueba se llamaba examen indirecto, que tras encontrar alguna anormalidad en el examen, el paciente era llevado a un examen más específico, como la  endoscopia. 

-Marcador tumoral CA19-9

Es una glicoproteína que en concentraciones mayores de 37UL/ml puede determinar la presencia de cáncer gástrico (62%).

-Endoscopia

Es una herramienta que sirve para diagnosticar, estadificar y tratar a los pacientes con cáncer gástrico, además  permite  establecer  la  ubicación del cáncer y tomar muestras de estas lesiones ante sospecha de malignidad.

Prueba Confirmatoria

El principal exámen que se debe realizar para confirmar o descartar un cáncer de estómago es la endoscopía superior, procedimiento utilizado para estudiar el interior, a fin de verificar si existen zonas anormales. Cuando se encuentra alguna alteración en este examen se procede a realizar una biopsia que es enviada a patología para su examen y determinación de la presencia o ausencia de cáncer.

Bibliografías: 

• Juan CA, Juan DL. Tamización de cáncer gástrico. Rev. Cient. Jav. [Internet]. 2013. [Citado, 01 de noviembre 2018]; 54(2). Disponible: http://www.redalyc.org/html/2310/231030019006/
• Rosario AF. Tamización de cáncer gástrico: ¿es la endoscopia la mejor elección?.Rev Col Gastroenterol. [Internet]. 2010. [Citado, 01 de noviembre 2018]; 25(1). Disponible:http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-99572010000100004