Técnicas de Edición Genómica en Cáncer Gástrico

El desarrollo de nuevos enfoques terapéuticos para el cáncer gástrico, como la terapia génica es de gran necesidad en la medicina actual.

p53 es conocida como la "guardia genoma" y desempeña papeles importantes en varios procesos celulares, incluyendo la regulación del ciclo celular, reparación del daño en el ADN y la apoptosis. Las mutaciones genéticas en p53 están presentes en> 50% de los tejidos tumorales humanos, y es la mutación genética más comúnmente detectado en el cáncer. Por lo tanto, una estrategia de terapia génica se ha desarrollado que emplea RAD-p53, un adenovirus debilitado que lleva la de tipo salvaje p53 gen. RAD-p53 se ha demostrado que inhibe el crecimiento del tumor, promover la apoptosis mediante la inducción de la expresión de Puma, Bax, Bak y Fas, y para sensibilizar a las células tumorales a la radioterapia y la quimioterapia.

           

Bibliografía:

• Dures C, Almeida G M, Seruca R, et al. Biomarkers for gastric cancer: pronostic, predictive or targets od therapy. Virchows arch [internet]. 2014[citado 14 diciembre 2018]; 464(3):367-378. Disponible en: https://sci-hub.se/10.1007/s00428-013-1533-y
  
  
• Ming S, Fei-yan J, Xia R, et al. Decreased expression of long noncoding RNA GAS5 indicates poor prognosis and promotes cell proliferation in gastric cancer. BMC cancer [internet]. 2014[citado 14 diciembre 2018]; 14:319. Disponible en:https://bmccancer.biomedcentral.com/articles/10.1186/1471-2407-14-319

Terapia con Stem Cell en el Cáncer Gástrico

Estudios recientes han demostrado que los tumores contienen células cancerosas heterogéneos fenotípicamente y funcionalmente que son capaces de mantener el crecimiento a largo plazo del tumor, recurrencia tumoral y la apoptosis y la resistencia a la quimioterapia. La inflamación crónica debido a la infección por H.pylori juega un papel importante en la transformación de células madre residentes en las células tumorales.

Sin embargo se están investigando nuevos tratamientos, como: combinación de apoptosis asociada a la quimioterapia, terapias dirigidas GCSC cáncerigenas que han sido identificadas por moléculas de superficie celular CD44-FITC; y la inhibición de las vías de GCSC; con el fin de destruir a estas GCSC alteradas y luego insertar otras CGSC que han sido cultivadas a partir de otros tejidos de la misma persona.

Bibliografia:

• Gastric cancer stem cells: A novel therapeutic target. [Citado, 2 de diciembre de 2018] Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3755024/pdf/nihms469523.pdf
• Identification of Gastric Cancer Stem Cells Using the Cell Surface [Citado, 2 de diciembre de 2018] Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2746367/pdf/nihms122496.pdf
• Kang. L, Zeng. D,  Yu-Qiang. N. Gastric cancer stem cells in gastric carcinogenesis, progression, prevention and treatment. (20) 18. [Internet] 2014. [Citado, 02 de diciembre de 2018]. Disponible en:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4017057/

Transgénicos en el Cáncer Gástrico

El ratón transgénico INS-GAS, que sobreproduce gastrinas amidadas(se ha postulado como un cofactor en el desarrollo de distintos tipos de cáncer), presenta aumento del número de células parietales y ECL, asociado a hipersecreción de ácido. Sin embargo, a los 20 meses de vida son aclorhídricos por pérdida de células parietales y ECL, para luego presentar metaplasia intestinal, displasia y finalmente cáncer. Todo este proceso se acelera en presencia de Helicobacter pylori (HP). Por el contrario, al administrarle YF 476 (antagonista de CCK-2) más antagonistas H2 se inhibe todo el proceso. A su vez, el ratón knockout deficiente en gastrina presenta atrofia de la mucosa gástrica y baja secreción, las células parietales no completan su maduración y no migran a la base de la cripta, asociándose a esto una disminución en el número de células ECL. 

VENTAJAS:

1)    Al ser un mamífero el OGM en una gran parte de procesos bioquímicos guardan estrechas similitudes con los de la especie humana.

2)    El ratón junto con el hombre, son los mamíferos mejor estudiados desde el puno de vista genético.

3)    Al utilizar OGM como los ratones presentan gran variedad de líneas consanguíneas congénitas y consómicas, además de cientos de mutaciones y gran número de reordenaciones cromosómicas.

4)    El genoma del ratón es susceptible de manipulación genética.

5)    Los modelos de ratón tienen una serie de características que los hacen idóneos para el estudio de procesos cancerígenos.

DESVENTAJAS:

1)    Implicación de organizaciones de protección animal en contra del uso inadecuado de animales.

2)    Son procesos perjudiciales que van en contra de la integridad de los animales, presentan partos son más largos y dolorosos y pocos fetos logran sobrevivir.

3)    Deformaciones en gran cantidad de los OGM.

4)    Implicaciones jurídicas, por ejemplo en nuestro país se prohíbe pero se está tratando una  reforma.

5)    Los OGM tienen menor tiempo de vida por las implicaciones genéticas que tienen en su genoma sobrellevándoles a sufrimiento. 

Bibliografia:

• Andres. M, Guillermo. W, Jaime. J. Redclinica.cl. Gastrina: hormona de múltiples funciones. [Citado, 30 de noviembre de 2018] Disponible en:https://www.redclinica.cl/Portals/0/Users/014/14/14/Publicaciones/Revista/gastrina_hormona_multiples%20funciones.pdf
• Animales Transgénicos y Knock Out para el estudio del Cáncer. [Citado, 30 de noviembre de 2018] Disponible en: https://books.google.es/books?hl=es&lr=&id=Xgq-kjkRcG4C&oi=fnd&pg=PA89&dq=OBTENCION+DE+RATONES+TRANSGENICOS&ots=t3s5nfUVCJ&sig=WTYuB5Y0s-Clj1U_CmBlvH4lYK8#v=onepage&q=OBTENCION%20DE%20RATONES%20TRANSGENICOS&f=false
• Eequiel. F, Margarita. C, Carmen. M. Infección, inflamación y cáncer Gástrico. Salud publica Mex. 51(5) [Internet]. 2009. [Citado, 30 de noviembre de 2018] Disponible en: http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0036-36342009000500010

ADN recombinante en la naturaleza y ADN recombinante artificial en Cáncer Gástrico

DNA Recombinante en la naturaleza (plásmidos)

El DNA se recombina de forma natural mediante procesos como la reproducción sexual, la transformación bacteriana y la infección viral.  En el caso de las bacterias, como el Helicobacter pylori la transformación le permite capturar DNA libre que puede ser parte del cromosoma de otra bacteria, incluso de otra especie bacteriana; también puede haber transformación cuando capturan diminutas moléculas de DNA llamadas plásmidos, los cuales le permiten a las bacterias crecer en ambientes nuevos; un claro ejemplo de esto lo encontramos en las bacterias que tienen plásmidos resistentes a antibióticos. 

DNA Recombinante Artificial

La tecnología del ADN recombinante, se basa en incorporar el gen humano de una proteína conocida, a través de una molécula de ADN artificial formada in vitro, a una célula hospedera. Se usa básicamente para la obtención de anticuerpos monoclonales. Las citoquinas más usadas como tratamiento directo del cáncer son:

-El Interferón alfa: son producidas por distintas células e incluyen un rango amplio de actividades biológicas, como son: la inducción de resistencia celular a virus, regulación de la función inmune, regulación del crecimiento y diferenciación de muchos tipos celulares.

-La Interleuquina 2: induce la actividad biológica a través de un receptor específico de membrana, el cual se encuentra frecuentemente expresado en las células inmunes, ya que juega un rol central en la respuesta inmune, como consecuencia de la activación antigénica.

Bibliografia:

• Josefa R, Lina M, Nataly C. Terapia génica para el tratamiento del cáncer. Rev. colomb. cancerol. [Internet]. 2014. [Citado, 23 de noviembre 2018]; 18(1). Disponible:http://www.scielo.org.co/scielo.php?pid=S0123-90152014000100005&script=sci_arttext&tlng=es

Western Blot para Cáncer Gástrico

El ensayo MP Diagnostics(MPD) HELICO BLOT 2.1 Western blot Kit Assay es un ensayo enzimático cualitativo para la detección de anticuerpos frente a Helicobacter pylori (H. pylori) en suero o plasma humanos, con la indicación adicional de estado de infección actual. Esta es una versión mejorada de HELICO BLOT 2.0 donde además del lisado bacterial, hay un antígeno recombinante de lato valor predictivo para la indicación de infección actual por H. pylori. El producto esta destinado para uno como prueba serológica para la detección tanto de infección actual como infección pasada con H. pylori.

Bibliografía: 

• Jing L , Barry R , Sufang H; et al. [Internet]. 2013 [citado, 16 de noviembre 2018]; 141(12). Disponible en: https://translational-medicine.biomedcentral.com/track/pdf/10.1186/1479-5876-11-241
• Valdés S, Latteri L, Polus. Tumorigenesis Gastrica.[internet]. 2014.[citado, 16 de noviembre de 2018];51(1). Disponible en: http://www.scielo.org.ar/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1851-30342014000100006
• Eugenia M, Karl S, Henry D; et al. Inmunoglobulina anti helicobacter pylori por Elisa y Western Blot.[internet]. [citado, 16 de noviembre de 2018]. Disponible en: http://actamedica.medicos.cr/index.php/Acta_Medica/article/view/538/499

Prueba de PCR para el Cáncer Gástrico

Tema: Evaluación de diferentes pruebas para el diagnóstico de Helicobacter pylori.

Objetivo: Determinar índice de desempeño, sensibilidad, especificidad y valores de cuatro métodos invasivos del Helycobacter pylori.

Tipo de Muestra Biológica: Biopsia de mucosa gástrica.

Tipo de Ácido Nucleico a ser extraído: ADN genómico bacteriano. 

Método Físico: Congelación a -20oC 

Método Químico: Amortiguador Tris-HCl 50 mM,pH7.2; EDTA 1mM con SDS al 1% y 100 µg de proteinasa K/ml.

Gen o secuencia a amplificar: gen ureC.

PCR: Stándar, 35 ciclos.

Visualización: EFO

Bibliografía: 

• Emiko R, Masanori S, David Y. PCR Detection of Helicobacter pylori in Clinical Samples. Methods Mol Biol.  [Internet], 2013.  [Citado 10 noviembre 2018]. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC3973746/pdf/nihms564458.pdf

Una Prueba de Tamizaje y Una Confirmatoria para el Cáncer Gástrico

 Prueba de Tamizaje

-Test de pepsinógeno sérico

Esta es una prueba serológica no invasiva que consiste en la medición de los dos tipos de pepsinógenosérico (PGi y PGii). 

-Gastrina-17

Para identificar inicialmente pacientes con gastritis atrófica. Sin embargo, en pacientes con presencia de cáncer gástrico, existe un marcado aumento de las cantidades de gastrina-17, pero no diferencia si el cáncer se encuentra en una fase temprana o avanzada.

-Estudios con bario

Inicialmente esta prueba se llamaba examen indirecto, que tras encontrar alguna anormalidad en el examen, el paciente era llevado a un examen más específico, como la  endoscopia. 

-Marcador tumoral CA19-9

Es una glicoproteína que en concentraciones mayores de 37UL/ml puede determinar la presencia de cáncer gástrico (62%).

-Endoscopia

Es una herramienta que sirve para diagnosticar, estadificar y tratar a los pacientes con cáncer gástrico, además  permite  establecer  la  ubicación del cáncer y tomar muestras de estas lesiones ante sospecha de malignidad.

Prueba Confirmatoria

El principal exámen que se debe realizar para confirmar o descartar un cáncer de estómago es la endoscopía superior, procedimiento utilizado para estudiar el interior, a fin de verificar si existen zonas anormales. Cuando se encuentra alguna alteración en este examen se procede a realizar una biopsia que es enviada a patología para su examen y determinación de la presencia o ausencia de cáncer.

Bibliografías: 

• Juan CA, Juan DL. Tamización de cáncer gástrico. Rev. Cient. Jav. [Internet]. 2013. [Citado, 01 de noviembre 2018]; 54(2). Disponible: http://www.redalyc.org/html/2310/231030019006/
• Rosario AF. Tamización de cáncer gástrico: ¿es la endoscopia la mejor elección?.Rev Col Gastroenterol. [Internet]. 2010. [Citado, 01 de noviembre 2018]; 25(1). Disponible:http://www.scielo.org.co/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0120-99572010000100004